ABX Pentra Enzymatic Creatinine CP

2011/12/16
A93A01273APL
Chemia kliniczna
A11A01907
22 mL
ABX Pentra
Enzymatic Creatinine CP
8 mL
■ Pentra C200
Zastosowanie: Odczynnik diagnostyczny do oznaczania ilościowego in vitro
stężenia kreatyniny w surowicy, osoczu i moczu metodą kolorymetryczną.
Aspekty kliniczne (1, 2)
Kreatynina powstaje w mięśniach i jest produktem
degradacji
fosforanu
kreatyniny,
składnika
magazynującego duże ilości energii. Poziom kreatyniny
jest w znacznej mierze stały (w przeciwieństwie do
poziomu mocznika), zależy on przede wszystkim od masy
mięśniowej. Dieta, wiek, płeć ani aktywność fizyczna nie
mają większego wpływu na poziom kreatyniny. Jest ona
usuwana z osocza w drodze filtracji kłębuszkowej, po
czym jest wydalana w moczu. Pomiar stężenia kreatyniny
w moczu pozwala na ocenę filtracji nerek, która jest
niezależnym parametrem w diurezie oraz gospodarce
proteinowej.
Poziom
kreatyniny
doskonale
odzwierciedla
funkcjonowanie nerek, choć poziom kreatyniny w surowicy
nie wzrasta, dopóki czynność nerek nie spadnie o co
najmniej 50%.
Metoda
Form-0846 Rev.4
Kreatyna + H2O
Odczynniki
ABX Pentra Enzymatic Creatinine CP jest odczynnikiem
gotowym do użycia.
Reagent 1:
Bufor (pH 7,5 w 25°C)
Amidinohydrolaza kreatyny (bakteryjna)
> 12000 U/L
Oksydaza sarkozyny (bakteryjna)
> 4000 U/L
N-etylo-N-sulfopropylo-m-toluidyna
> 0,24 mmol/L
Oksydaza askorbinianowa (roślinna)
Stabilizatory
Środki powierzchniowo czynne
Konserwant
Reagent 2:
Metoda enzymatycznego pomiaru kreatyniny jest
procedurą wieloetapową, kończącą się fotometrycznym
pomiarem punktu końcowego. Do przekształcenia
kreatyniny w kreatynę wykorzystuje się amidohydrolazę
kreatyniny.
W obecności amidohydrolazy kreatyna rozpada się na
sarkozynę oraz mocznik. Kolejne reakcje enzymatyczne z
udziałem oksydazy sarkozyny oraz peroksydazy prowadzi
do powstania barwnego chromogenu, odczytywanego za
pomocą fali o długości 545 nm.
Kreatynina + H2O
ESPMT: N-etylo-N-sulfopropylo-m-toluidyna
Amidohydrolaza kreatyniny
——————›
Kreatyna
Amidinohydrolaza kreatyny
——————›
Sarkozyna + mocznik
Sarkozyna + H2O + O2
Oksydaza sarkozyny
——————›
Glicyna + HCHO + H2O2
Peroksydaza
2 H2O2 + 4-aminoantypiryna + ESPMT ——————› Chinonoimina + 4 H2O
S.A.S. au capital de 41.700.000 € - RCS Montpellier 328 031 042 - SIRET 328 031 042 000 42 - APE 332 B
Bufor (pH 7,5 w 25°C)
Amidohydrolaza kreatyniny (bakteryjna)
> 135000 U/L
4-aminoantypiryna
> 1,5 mmol/L
Peroksydaza (roślinna)
> 2000 U/L
Stabilizatory
Środki powierzchniowo czynne
Azydek sodu
7,7 mmol/L
ABX Pentra Enzymatic Creatinine CP należy używać
zgodnie z niniejszą ulotką. Producent nie może
zagwarantować właściwego działania produktu, jeśli
zostanie on użyty w sposób inny od podanego.
Postępowanie z preparatem
1. Wyjmij obie zatyczki kasety.
Najnowsza wersja dokumentacji: www.horiba.com
Chemia kliniczna
ABX Pentra
Enzymatic Creatinine CP
2. Jeżeli odczynnik zawiera pianę, usuń ją za pomocą
plastikowej pipety.
■ Świeży, odwirowany mocz.
3. Umieść kasetę w chłodzonej komorze odczynnikowej
analizatora Pentra C200.
Stabilność (3):
Surowica, osocze:
Kalibrator
Do celów kalibracji należy używać:
ABX Pentra Multical, nr ref. A11A01652 (do oddzielnego
zakupu)
10 x 3 mL (liofilizat)
Kontrola
Do wewnętrznej kontroli jakości należy używać:
ABX Pentra N Control, nr ref. A11A01653 (wymaga
osobnego zakupu)
10 x 5 mL (liofilizat)
ABX Pentra P Control, nr ref. A11A01654 (wymaga
osobnego zakupu)
10 x 5 mL (liofilizat)
ABX Pentra Urine Control L/H, nr ref. A11A01674
(wymaga osobnego zakupu)
1 x 10 mL + 1 x 10 mL
Oznaczenie kontrolne powinno być przeprowadzane raz
dziennie i/lub po wykonaniu kalibracji.
Częstość przeprowadzania kontroli oraz przedziały ufności
powinny być ustalone w oparciu o wytyczne laboratoryjne
oraz przepisy obowiązujące w danym kraju. Wynik kontroli
musi zawierać się w zdefiniowanych przedziałach ufności.
Każde laboratorium powinno wypracować sposób
postępowania w przypadku, gdy wyniki wykroczą poza
wyznaczone przedziały.
Wymagane komponenty niewchodzące w
skład produktu
■ Zautomatyzowany kliniczny analizator biochemiczny:
Pentra C200
■ Kalibrator: ABX Pentra Multical, nr ref. A11A01652
■ Kontrole:
ABX Pentra N Control, nr ref. A11A01653, i
ABX Pentra P Control, nr ref. A11A01654
ABX Pentra Urine Control L/H, nr ref. A11A01674
■ Standardowy sprzęt laboratoryjny
Próbka
■ Surowica.
■ Osocze heparynizowane lub osocze z EDTA.
S.A.S. au capital de 41.700.000 € - RCS Montpellier 328 031 042 - SIRET 328 031 042 000 42 - APE 332 B
Mocz:
7 dni
w temp. 20-25°C
7 dni
w temp. 4-8°C
3 mies.
w temp. -20°C
2 dni
w temp. 20-25°C
6 dni
w temp. 4-8°C
6 mies.
w temp. -20°C
Zakres odniesienia (4)
Każde laboratorium powinno wypracować swoje własne
zakresy odniesienia. Wartości podane w niniejszej ulotce
mają wyłącznie charakter orientacyjny.
Surowica/osocze:
Mężczyźni
Kobiety
6,2 - 11,0 mg/L
4,5 - 7,5 mg/L
0,62 - 1,10 mg/dL
0,45 - 0,75 mg/dL
55 - 96 µmol/L
40 - 66 µmol/L
Mocz (24 godziny):
Mężczyźni
Kobiety
14 - 26 mg/kg/dzień
11 - 20 mg/kg/dzień
124 - 230 µmol/kg/dzień
97 - 177 µmol/kg/dzień
Przechowywanie i stabilność
W nieotwieranych kasetach, odczynniki zachowują
stabilność do upływu terminu podanego na etykiecie, o ile
są przechowywane szczelnie zamknięte w temperaturze
2-8°C
oraz
chronione
przed
światłem
i
zanieczyszczeniem.
Stabilność po otwarciu: patrz rozdział pt. „Wydajność przy
użyciu w analizatorze Pentra C200”.
Sposób przeprowadzania pomiaru
Dla
zainteresowanych
dostępne
są
instrukcje
przeprowadzania
oznaczeń
na
systemach
zautomatyzowanych innych niż Pentra C200 (niedostępne
w Stanach Zjednoczonych).
Najnowsza wersja dokumentacji: www.horiba.com
Chemia kliniczna
ABX Pentra
Enzymatic Creatinine CP
Uszkodzenie opakowania
Dokładność i precyzja:
W przypadku zniszczenia opakowania ochronnego, nie
należy używać odczynnika, jeżeli uszkodzenie mogło
wpłynąć na jego właściwości.
■ Powtarzalność (precyzja w trakcie pracy urządzenia)
Postępowanie z odpadami
Urządzenie przeprowadza 20 razy oznaczenia dla 3
próbek o niskim, średnim oraz wysokim stężeniu oraz dla
2 kontroli, zgodnie z zaleceniami procedury Valtec (6).
Wartość średnia
■ Należy postępować zgodnie z lokalnie obowiązującymi
przepisami.
■ Opisywany odczynnik jest konserwowany azydkiem
sodu, obecnym w stężeniu poniżej 0,1%. Azydek sodu
może wchodzić w reakcje z ołowiem lub miedzią,
tworząc wybuchowe azydki metali.
Ogólne środki ostrożności
■ Niniejszy odczynnik jest przeznaczony wyłącznie do
profesjonalnej diagnostyki in vitro.
■ Nie połykać. Unikać zanieczyszczenia skóry i błon
śluzowych.
■ Korzystając z niej, należy stosować standardowe
laboratoryjne środki ostrożności.
■ Kasety odczynnikowe są kasetami jednorazowego
użytku, należy je utylizować zgodnie z lokalnymi
przepisami.
■ Należy uważnie zapoznać się z kartą charakterystyki
(MSDS) dołączoną do odczynnika.
■ Nie używać produktu, jeżeli można zaobserwować
zmianę jego cech biologicznych, chemicznych lub
fizycznych, co wskazuje na jego nieprzydatność do
użytku.
Wydajność przy użyciu w analizatorze
Pentra C200
Dane przedstawione poniżej pochodzą z oznaczeń
przeprowadzonych przy użyciu analizatora Pentra C200.
Surowica, osocze
Liczba oznaczeń: ok. 125
Stabilność robocza odczynników:
Po otwarciu, kaseta z odczynnikiem umieszczona w
chłodzonej komorze analizatora Pentra C200 zachowuje
stabilność przez 42 dni.
Objętość próbki: 5,6 µL/oznaczenie
Granica oznaczalności:
Granicę oznaczalności określono zgodnie z zaleceniami
CLSI (NCCLS), procedura EP17-A (5) i wynosi ona
6,3 µmol/L (0,071 mg/dL).
S.A.S. au capital de 41.700.000 € - RCS Montpellier 328 031 042 - SIRET 328 031 042 000 42 - APE 332 B
CV %
µmol/L
mg/dL
Próbka
kontrolna 1
76,86
0,869
0,62
Próbka
kontrolna 2
338,43
3,824
0,64
Próbka 1
51,59
0,583
0,71
Próbka 2
139,09
1,572
0,69
Próbka 3
572,57
6,470
0,64
■ Powtarzalność (precyzja całkowita)
Urządzenie przez 20 dni przeprowadza podwójne
oznaczenia dla 3 próbek osocza o niskim, średnim i
wysokim stężeniu oraz dla 2 kontroli (2 serie dziennie),
zgodnie z zaleceniami CLSI (NCCLS), procedura EP5-A2
(7).
Wartość średnia
CV %
µmol/L
mg/dL
Próbka
kontrolna 1
76,44
0,864
1,34
Próbka
kontrolna 2
337,04
3,809
1,11
Próbka 1
52,68
0,595
1,49
Próbka 2
142,46
1,610
1,11
Próbka 3
605,06
6,837
1,67
Zakres pomiaru:
Analiza potwierdziła zakres pomiaru od 6,3 do
2000,0 µmol/L (od 0,071 do 22,600 mg/dL), z
automatycznym
rozcieńczeniem
następczym
do
6000 µmol/L (67,800 mg/dL).
Liniowość odczynnika ustalono zgodnie z zaleceniami
CLSI (NCCLS), procedura EP6-A na 2000,0 µmol/L
(22,600 mg/dL) (8).
Korelacja:
113 próbek pobranych od pacjenta (surowica) koreluje się
z komercyjnie dostępnym odczynnikiem, służącym jako
wzorzec, zgodnie z zaleceniami CLSI (NCCLS), procedura
EP9-A2 (9). Wartości zawierały się w zakresie od 25,6 do
1459,5 µmol/L (od 0,3 do 16,5 mg/dL).
Najnowsza wersja dokumentacji: www.horiba.com
Chemia kliniczna
ABX Pentra
Enzymatic Creatinine CP
Równanie dla otrzymanej linii allometrycznej (regresja
Passing Bablock) (10) wygląda następująco:
Y = 1,00 X - 1,67 (µmol/L)
Y = 1,00 X - 0,02 (mg/dL)
przy współczynniku korelacji r2 = 0,9998
Czynniki zakłócające:
Nie obserwuje się statystycznie
istotnego wpływu do 73 µmol/L
(125 mg/dL).
Triglicerydy:
Nie obserwuje się znaczącego
wpływu do 7,0 mmol/L (612,5 mg/dL)
(jako intralipid®, świadczący o
lipemii).
Bilirubina
Nie obserwuje się statystycznie
całkowita:
istotnego wpływu do 400 µmol/L
(23,4 mg/dL).
Bilirubina
Nie obserwuje się statystycznie
bezpośrednia:
istotnego wpływu do 200 µmol/L
(11,7 mg/dL).
Young podaje także inne ograniczenia, a w szczególności
listę leków oraz zmiennych przedanalitycznych, które
według obecnego stanu wiedzy wpływają na wyniki tej
metody (11, 12).
Dokładność i precyzja:
■ Powtarzalność (precyzja w trakcie pracy urządzenia)
Urządzenie przeprowadza 20 razy oznaczenia dla 3
próbek o niskim, średnim oraz wysokim stężeniu oraz dla
2 kontroli, zgodnie z zaleceniami procedury Valtec (6).
Hemoglobina:
Stabilność kalibracji:
Odczynnik jest kalibrowany w dniu 0. Stabilność kalibracji
jest kontrolowana przez wykonanie testów na 2 próbkach
kontrolnych.
Stabilność kalibracji wynosi 14 dni.
Uwaga: Ponowną kalibrację odczynnika zaleca się w
przypadku zmiany jego serii oraz w przypadku, gdy wyniki
kontroli jakości wykroczą poza założony zakres.
Wersja aplikacji:
Wartość średnia
CV %
µmol/L
mg/dL
Próbka
kontrolna 1
5717,74
64,6
1,16
Próbka
kontrolna 2
12668,68
143,2
0,73
Próbka 1
1052,98
11,9
1,22
Próbka 2
8332,06
94,2
1,12
Próbka 3
21023,95
237,6
1,20
■ Powtarzalność (precyzja całkowita)
Urządzenie przez 20 dni przeprowadza podwójne
oznaczenia dla 3 próbek osocza o niskim, średnim i
wysokim stężeniu oraz dla 2 kontroli (2 serie dziennie),
zgodnie z zaleceniami CLSI (NCCLS), procedura EP5-A2
(7).
Wartość średnia
CV %
µmol/L
mg/dL
Próbka
kontrolna 1
5681
65,3
2,35
Próbka
kontrolna 2
12654
144,5
2,25
Próbka 1
1049
12,1
2,02
Próbka 2
8389
96,5
1,90
01.xx
Próbka 3
21228
244,1
1,82
Mocz
Zakres pomiaru:
Po otwarciu, kaseta z odczynnikiem umieszczona w
chłodzonej komorze analizatora Pentra C200 zachowuje
stabilność przez 42 dni.
Analiza potwierdziła zakres pomiaru od 77 do
25000 µmol/L (od 0,87 do 282,5 mg/dL), z automatycznym
rozcieńczeniem
następczym
do
75000
µmol/L
(847,5 mg/dL).
Liniowość odczynnika ustalono zgodnie z zaleceniami
CLSI (NCCLS), procedura EP6-A na 25000 µmol/L
(282,5 mg/dL) (8).
Objętość próbki: 5,6 µL/oznaczenie
Korelacja:
Liczba oznaczeń: ok. 125
Stabilność robocza odczynników:
Granica oznaczalności:
Granicę oznaczalności określono zgodnie z zaleceniami
CLSI (NCCLS), procedura EP17-A (5) i wynosi ona
77 µmol/L (0,87 mg/dL).
S.A.S. au capital de 41.700.000 € - RCS Montpellier 328 031 042 - SIRET 328 031 042 000 42 - APE 332 B
118 próbek pobranych od pacjenta (mocz) koreluje się z
komercyjnie dostępnym odczynnikiem, służącym jako
wzorzec, zgodnie z zaleceniami CLSI (NCCLS), procedura
EP9-A2 (9). Wartości zawierały się w zakresie od 191,4 do
22397,9 µmol/L (od 2,2 do 253,1 mg/dL).
Najnowsza wersja dokumentacji: www.horiba.com
Chemia kliniczna
ABX Pentra
Enzymatic Creatinine CP
Równanie dla otrzymanej linii allometrycznej (regresja
Passing Bablock) (10) wygląda następująco:
Y = 0,98 X + 62,75 (µmol/L)
Y = 0,98 X + 0,71 (mg/dL)
przy współczynniku korelacji r2 = 0,9949
Czynniki zakłócające:
Hemoglobina:
Nie obserwuje się statystycznie
istotnego wpływu do 290 µmol/L
(500 mg/dL).
Triglicerydy:
Nie obserwuje się znaczącego
wpływu do 7,0 mmol/L (612,5 mg/dL)
(jako intralipid®, świadczący o
lipemii).
Bilirubina
Nie obserwuje się statystycznie
bezpośrednia:
istotnego wpływu do 400 µmol/L
(23,4 mg/dL).
Kwas
Nie obserwuje się statystycznie
askorbinowy:
istotnego wpływu do 340 µmol/L
(5,9 mg/dL).
Young podaje także inne ograniczenia, a w szczególności
listę leków oraz zmiennych przedanalitycznych, które
według obecnego stanu wiedzy wpływają na wyniki tej
metody (11, 12).
Stabilność kalibracji:
Odczynnik jest kalibrowany w dniu 0. Stabilność kalibracji
jest kontrolowana przez wykonanie testów na 2 próbkach
kontrolnych.
Stabilność kalibracji wynosi 14 dni.
Uwaga: Ponowną kalibrację odczynnika zaleca się w
przypadku zmiany jego serii oraz w przypadku, gdy wyniki
kontroli jakości wykroczą poza założony zakres.
Wersja aplikacji:
01.xx
2.
Newman DJ, Price CP. Non protein nitrogen
metabolite. Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry,
5th Ed., Burtis CA and Ashwood ER. (W.B. Saunders
eds. Philadelphia USA), (2001): 414.
3. Use of anticoagulants in diagnostic laboratory
investigations. WHO publication WHO/DIL/LAB/99.1
Rev.2 (2002).
4. Roberts WL, McMillin GA, Burtis CA, Bruns DE.
Reference Information for the Clinical Laboratory,
TIETZ Textbook of Clinical Chemistry and Molecular
Diagnostics. 4th Ed; Burtis CA, Ashwood ER, Bruns
DE, (Elsevier Saunders eds. St Louis, USA), (2006):
2264.
5. Protocols for determination of limits of detection and
limits of quantitation. Approved Guideline, CLSI
(NCCLS) document EP17-A (2004) 24 (34) .
6. Vassault A, Grafmeyer D, Naudin C et al. Protocole
de validation de techniques (document B). Ann. Biol.
Clin. (1986) 44: 686-745.
7. Evaluation of Precision Performance of Quantitative
Measurement Method. Approved Guideline, CLSI
(NCCLS) document EP5-A2 (2004) 24 (25).
8. Evaluation of the Linearity of Quantitative Analytical
Methods. Approved Guideline, CLSI (NCCLS)
document EP6-A (2003) 23 (16).
9. Method Comparison and Bias Estimation Using
Patient Samples. Approved Guideline, 2nd ed., CLSI
(NCCLS) document EP9-A2 (2002) 22 (19) .
10. Passing H, Bablock W. A new biometrical procedure
for testing the equality of measurements from two
different analytical methods. J. Clin. Chem. Clin.
Biochem. (1983) 21: 709-20.
11. Young DS. Effects of Drugs on Clinical Laboratory
Tests. 4th Edition, Washington, DC, AACC Press
(1997) 3: 143-163.
12. Young DS. Effects of Preanalytical Variables on
Clinical Laboratory Tests. 2nd Edition, Washington,
DC, AACC Press (1997) 3: 120-132.
Współczynnik konwersji:
µmol/L x 0,0113 = mg/dL
Ostrzeżenie
Użytkownik ma obowiązek sprawdzić, czy niniejszy
dokument dotyczy używanego odczynnika.
Bibliografia
1.
Allston CA. Non protein nitrogenous compounds and
renal function. Clinical Chemistry: Concepts and
Application, Anderson SC, Cockayne S. (W.B.
Saunders eds. Philadelphia USA), (1993): 369.
S.A.S. au capital de 41.700.000 € - RCS Montpellier 328 031 042 - SIRET 328 031 042 000 42 - APE 332 B
Najnowsza wersja dokumentacji: www.horiba.com