Reveal Q+ for Fumonisin

Reveal Q+ for Fumonisin
Paskowy test ilościowy do wykrywania
Fumonizyn
NEO 8885
Stosowany z czytnikiem Reveal AccuScan III
wersja 4.22 lub nowsza
o
Przechowywać w temperaturze 18-30 C
Nie zamrażać
Diagnostyka Rolno-Spożywcza
Sprzedaż i Serwis : +48 22 853 45 80/76
[email protected]
Reveal Q+ for Fumonisin
Toksyna
Odkryte w 1989 roku Fumonizyny należą do rodziny mykotoksyn wytwarzanych przez różne formy
pleśni z rodzaju Fusarium. Formy te najczęściej porażają zboża (są one uważane za
wszechobecne
w
kukurydzy)
i
ryżu,
a
więc
ryzyko
obecności
fumonizyn
w
paszach
i produktach spożywczych jest wysokie. Fumonizyny wpływają na różne zwierzęta inaczej i są
powiązane z powstawaniem raka przełyku u ludzi. Agencja Ochrony Środowiska sklasyfikowała
fumonizyny jako kategoria II-B produkty rakotwórczych.
Konie są
bardzo
wrażliwe
nawet na
niskie
ilości fumonizyny, które mogą
powodować
leukoencephalomalcię (skraplanie mózgu). U świń, fumonizyna atakuje układ sercowy, powodując
obrzęk płuc, wątroby, jak zmiany w trzustce.
Limity dopuszczalnych poziomów Fumonizyn ustalone przez FDA:
Do spożycia przez ludzi:
Rodzaj
Poziom
Suche zmielone produkty kukurydziane
2 ppm
Całe / rozdrobnione suche zmielone produkty kukurydziane,
suche bielone otręby kukurydziane, oczyszczona kukurydza
do produkcji masowej
4 ppm
Oczyszczona kukurydza na popcorn
3 ppm
Pasza dla zwierząt (kukurydza / produkty uboczne z kukurydzy, całkowita ilość fumonizyn)
Zwierzę
Poziom
Konie i króliki
5 ppm, ≤ 20% diety
Trzoda chlewna i sumy
20 ppm, ≤ 50% diety
Hodowlane przeżuwacze, drób, norki
30 ppm, ≤ 50% diety
Przeżuwacze powyżej 3 miesiąca przygotowywane do uboju,
norki przygotowywane do skórowania
60 ppm, ≤ 50% diety
Drób przygotowywany do uboju
100 ppm, ≤ 50% diety
Wszystkie inne gatunki i klasy zwierząt gospodarskich i
zwierząt domowych
10 ppm, ≤ 50% diety
Diagnostyka Rolno-Spożywcza
Sprzedaż i Serwis : +48 22 853 45 80/76
[email protected]
Reveal Q+ for Fumonisin
Regulacje UE dla Fumonizyn (Razem B1 i B2) są następujące:
Żywność
Kukurydza nieprzetworzona
Mąka kukurydziana, mąka, kasza, kiełki i olej
Żywność na bazie kukurydzy przeznaczona do bezpośredniego spożycia
przez ludzi, oprócz wyżej wymienionych
Odżywki dla niemowląt na bazie kukurydzy
Poziomy
Maksymalne
2 ppm
1 ppm
0,4 ppm
0,2 ppm
Zastosowanie testu
Test Reveal Q+ Fumonizyny jest stosowany do szybkiej ilościowej analizy zawartości Fuminizyn
w kukurydzy i produktach kukurydzianych. Kierowany jest do osób zajmujących się kontrolą Jakości
produktów możliwie zanieczyszczonych Fumonizynami.
Zasada działania testu
Test jest jednostopniowym paskowym testem immunochromatograficznym działającym na zasadzie
konkurencyjnej techniki immunologicznej.
Ekstrakt przenika do strefy z reagentami zawierającymi przeciwciała specyficzne dla Fumonizyn
skoniugowane z cząsteczkami złota. Jeżeli w badanej próbce obecne są Fumonizyny to w tej strefie
wychwytywana jest przez przeciwciało na skutek czego tworzy się kompleks: Fumonizyna +
przeciwciało. Z kolei ten kompleks przenika dalej do strefy membranowej, w której Fumonizyna
skonjugowana jest z nośnikiem białkowym. W tej strefie wszystkie nie związane przeciwciała
specyficzne dla Fumonizyn są wychwytywane, a cząstki barwne koncentrują się tworząc widoczną
poprzeczną linię na pasku. Jeżeli w badanej próbce jest więcej Fumonizyn to w większym stopniu
będzie tworzył kompleksy ze specyficznymi przeciwciałami i cząsteczkami barwnymi, skutkiem czego
mniej przeciwciał Fumonizyn będzie wychwytywanych w strefie testowej paska. Z tego względu przy
wyższej koncentracji Fumonizyn w badanej próbce intensywność koloru na poprzecznej linii tworzącej
się na pasku jest słabsza. Alogorytmy zaprogramowane w czytniku Reveal AccuScan™ III przeliczają
intensywność tej linii na ilościowy wynik wyrażany w częściach na milion ppm (parts per milion = ppm).
Membrana zawiera także strefę kontrolną, w której immuno kompleks znajdujący się w strefie
reagentowej jest wychwytywany przez przeciwciała tworząc widoczną poprzeczną linię kontrolną.
Kontrolna linia formuje się zawsze, niezależnie od poziomu zawartości Fumonizyn w badanej próbce
i wskazuje na prawidłowe działanie testu.
Diagnostyka Rolno-Spożywcza
Sprzedaż i Serwis : +48 22 853 45 80/76
[email protected]
Reveal Q+ for Fumonisin
Przechowywanie
Zestaw należy przechowywać w temperaturze pokojowej (18 – 30C). Paski testowe należy
przechowywać w oryginalnych zamkniętych pojemnikach, w celu zachowania ich optymalnych
właściwości.
Skład zestawu

25 pasków testowych Reveal Q+

25 czerwonych probówek do rozcieńczeń

25 probówek na próbki

1 butelka z rozcieńczalnikiem do próbek

Instrukcja użycia
Materiały zalecane, nie znajdujące się w zestawie

65% roztwór etanolu (Neogen nr kat. 8071, 8072)

Pojemniki do pobierania próbek z nakrywkami (Neogen nr kat. 9428)

Młynek Agri Grind lub równorzędny (Neogen nr kat. 0401)

Waga o możliwości odważenia 5-50 g  0,1g (Neogen nr kat. 9427)

Stoper (Neogen nr kat.0426)

Statyw na probówki Reveal Sample Cup Rack (Neogen nr kat. 9475)

Czytnik Reveal AccuSan III (Neogen nr kat. 9590)

Cylinder miarowy o pojemności 100 ml (Neogen nr kat.9447,9448)

Strzykawka filtrująca lub filtr Whatman Nr.1 (Neogen nr kat. 9420)

Pojemniki do zbierania ekstraktu z korkami (Neogen nr kat. 9421, 9421B)

Pipeta 100l (Neogen nr kat. 9272, 9278)

Końcówki do pipety 100l (Neogen nr kat.9410, 9417 lub 9407)

Pipeta 500l lub 1000l (Neogen nr kat. 9336, 9342)

Końcówki do pipety 200-1000l (Neogen nr kat.9464, 9487)
Diagnostyka Rolno-Spożywcza
Sprzedaż i Serwis : +48 22 853 45 80/76
[email protected]
Reveal Q+ for Fumonisin
Uwagi i zalecenia
1. Paski testowe muszą być przetrzymywane wewnątrz suchego oryginalnego opakowania.
2. Etanol jest łatwopalny. Przechowywać opakowanie szczelnie zamknięte, z dala od ciepła
ognia i iskier oraz osób palących. Jest toksyczny po połknięciu lub po wchłonięciu oparów.
Unikać kontaktu ze skórą.
3. Zestaw należy przechowywać w temperaturze pokojowej (18 – 30C). Nie zamrażać.
4. Nie stosować testu po upływie jego terminu ważności.
5. Wszystkie stosowane w teście płyny, w tym ekstrakty próbek, jak również sprzęt laboratoryjny
należy traktować, jako zanieczyszczone Fumonizyną. W czasie wykonywania testu należy
stosować rękawiczki i odzież ochronną
6. W celu uniknięcia zanieczyszczenia krzyżowego, do każdej próbki należy stosować czysty
sprzęt laboratoryjny i dokładnie myć szkło przed użyciem go do następnej próbki.
Ustawienia czytnika AccuScan III
Czytnik AccuScan III musi mieć wersję oprogramowania 4.22 lub nowszą.
W celu uzyskania informacji na temat odpowiednich ustawień krzywej wzorcowej należy odnieść się
do opakowania testu lub certyfikatu Jakości testu.
1. Uruchomić program AccuScan III w czytniku.
2. Wybrać kategorię: Mycotoxin Q+ i rodzaj testu Fumonisin.
3. Wprowadzić numer próbki ID (opcjonalne).
4. Wprowadzić numer serii testu (lot number), wartości A,B,C,D, z opakowania testu lub wybrać
z historii (History) wcześniej wprowadzone dane.
Uwaga: Aby uzyskać bardziej szczegółowe informacje należy skorzystać z instrukcji obsługi czytnika
AccuScan III. Czytnik AccuScan III musi dopasować numer serii do analizowanego paska testowego.
Czytnik AccuScan III należy zaktualizować przed przystąpieniem do wykonywania analiz.
Przygotowanie i ekstrakcja próbek
Badane próbki powinny być pobrane zgodnie z zasadami przy pobieraniu próbek reprezentatywnych.
1. Uzyskać próbkę reprezentatywną. Zmielić pobraną próbkę do takiego stopnia, aby
co najmniej 75% zmielonego materiału przechodziło przez sito o 20 mesh, tj. miało wygląd
dobrze zmielonej kawy instant.
Diagnostyka Rolno-Spożywcza
Sprzedaż i Serwis : +48 22 853 45 80/76
[email protected]
Reveal Q+ for Fumonisin
2. Ekstrakcję prowadzić w stosunku: 1 część próbki do 5 części 65% roztworu etanolu. Na
przykład, do 10 gramów próbki dodać 50 ml 65% roztworu etanolu.
3. Energicznie wytrząsać przez 3 minuty lub mieszać w mieszalniku szybkoobrotowym przez 1
minutę. Pozostawić próbkę do odstania, a następnie przefiltrować przez strzykawę filtrującą
lub przez filtr papierowy.
ALTERNATYWNIE: (W metodzie USDA/GIPSA) Zmieszać 50 gramów próbki ze 250 ml 65%
roztworu etanolu i wytrząsać przez 3 minuty lub mieszać w mieszalniku szybkoobrotowym
przez 1 minutę.
4. Pozostawić próbkę do odstania, a następnie przefiltrować co najmniej 5ml przez strzykawę
filtrującą lub przez filtr papierowy Whatman Nr.1 i zebrać filtrat.
Procedura wykonania testu
1. Wyjąć niezbędną ilość czerwonych probówek do rozcieńczeń i przezroczystych probówek na
próbki. Umieścić je w stojaku.
2. Przy użyciu pipety i nowej końcówki wprowadzić po 200l rozcieńczalnika do próbek do
każdej probówki oznaczonej na czerwono.
3. Stosując nową końcówkę pipety do każdej próbki wprowadzić po 100l przefiltrowanych
ekstraktów badanych próbek do każdej czerwonej probówki z rozcieńczalnikiem. Mieszać
poprzez 5 krotne pipetowanie w górę i w dół.
4. Przenieść po 100l rozcieńczonego ekstraktu próbek do czystych przezroczystych probówek.
5. W każdej probówce umieścić pasek testowy Reveal Q+ Fumonisin, końcówką oznakowaną
„sample” do dołu. Pozostawić pasek testowy w próbce przez 6 minut.
6. Wyjąć pasek z probówki po upływie czasu 6 minut. Przejść do odczytu wyników.
Odczyt wyników na czytniku Reveal AccuScan
Testy powinny być odczytane w ciągu 1 minuty od zakończenia 6 minutowej inkubacji.
Aby uzyskać dodatkowe informacje na temat ustawień należy udać się do Reveal AccuScan III Set
Up.
1. Umieścić dokładnie pasek testowy Reveal Q+ w czarnym adapterze, najpierw strona
„sample”, stroną z rezultatami skierowanymi na zewnątrz.
Diagnostyka Rolno-Spożywcza
Sprzedaż i Serwis : +48 22 853 45 80/76
[email protected]
Reveal Q+ for Fumonisin
2. Umieścić adapter z testem, górną stroną skierowany w dół, w czytniku (linie testowe będą
skierowane w dół czytnika). Po włożeniu adaptera zaświeci się zielone światełko czytnik
rozpocznie automatycznie analizę testu. UWAGA: usunięcie adaptera z czytnika w trakcie
odczytu może prowadzić do niewłaściwych odczytów.
3. Czytnik AccuScan III przeanalizuje pasek testowy a uzyskane rezultaty zostaną wyświetlone
na ekranie oraz zapisane w pamięci czytnika.
Uwagi
1. Należy upewnić się, że pasek testowy jest właściwie (całkowicie) umieszczony w adapterze.
2. Odczyty powinny być wykonane pomiędzy 6 a 7 minutą. Odczyty dokonane po czasie
przekraczającym 7 minut mogą być niedokładne z powodu nadmiernego rozwinięcia paska
testowego.
3. Pasek testowy musi być odczytywany w czytniku Reveal AccuScan III Reader.
Charakterystyka testu
Test Reveal Q+ for Fumonisin został opracowany do ilościowej analizy Fumonizyn.
1. Limit detekcji: 1,3 ppm
2. Zakres pomiarowy: 0,3 – 6 ppm
UWAGA: aby oznaczyć zawartość Fumonizyn na poziomie przekraczającym 6 ppm należy
skontaktować się z serwisem technicznym.
Zwalidowane matryce
1. Kukurydza
Diagnostyka Rolno-Spożywcza
Sprzedaż i Serwis : +48 22 853 45 80/76
[email protected]
Reveal Q+ for Fumonisin
Serwis klienta
Noack Polen Sp. z o.o., ul. Królowej Marysieńki 50, 02-954 Warszawa, Tel. 22 853 45 80, fax. 22 853
77 26, [email protected]
Dostępne informacje MSDS
Materiały dotyczące bezpieczeństwa dla tego testu i wszystkich testów Neogenu są dostępne na
stronie www.neogen.com/msds.html.
Gwarancja
Neogen nie daje żadnych gwarancji na żaden sposób, również wykorzystania lub wprowadzania, z
wyjątkiem materiału, z którego produkty są wykonane, które mają standardową jakość. Jeżeli
jakiekolwiek materiały są wadliwe, Neogen dostarczy produkt zastępczy. Kupujący ponosi całkowite
ryzyko i odpowiedzialność za wyniki wynikające z użycia tego produktu. Nie ma gwarancji
sprzedawalności tego produktu, zdolności użytkowej do różnych celów. Neogen nie powinien być
odpowiedzialny za żadne uszkodzenia, włączając specjalne lub wynikające, lub koszty wynikające
bezpośrednio lub pośrednio ze stosowania produktu.
Diagnostyka Rolno-Spożywcza
Sprzedaż i Serwis : +48 22 853 45 80/76
[email protected]