Reveal Q+ for DON
Transkrypt
Reveal Q+ for DON
Reveal Q+ for DON Paskowy test ilościowy do wykrywania Deoksynivalenonu (DON) NEO 8385 Stosowany z czytnikiem Reveal AccuScan III wersja 4.21 lub nowsza o Przechowywać w temperaturze 18-30 C Nie zamrażać Diagnostyka Rolno-Spożywcza Sprzedaż i Serwis : +48 22 853 45 80/76 [email protected] Reveal Q+ for DON Toksyna Deoksynivalenol (DON) jest toksyną występującą powszechnie, wytwarzaną przez różowe pleśnie szczepu Fusarium graminearum. Toksyna ta należy do grupy Trichotecenów i jest wytwarzana przez grzyby żyjące na ziarnach pszenicy, kukurydzy, jęczmienia i roślin silosowych. DON wywołuje wymioty, obniża apetyt, powoduje zapalenie żołądka i jelit oraz biegunkę,a także utratę odporności immunologicznej i zakłócenia krążenia. Spośród zwierząt gospodarskich na DON najbardziej wrażliwe są świnie. Jeżeli stężenie DON w paszy dla tych zwierząt przekracza 1 ppm to zaprzestają pobierać paszę. U innych gatunków zwierząt DON jak i inne toksyny należące do Trichtecenów wywołują efekty zatrucia pokarmowego. DON utrudnia produkcję zdrowej żywności dla ludzi ,gdyż pogarsza jej smak. Dotyczy to szczególnie tych artykułów zbożowych, które przeznaczone są do konsumpcji bez przetwarzania. Z tego względu dokładne oznaczanie poziomu DON w żywności i paszach jest bardzo ważna częścią kontroli jakości tych produktów. Badania te wymagają jednak dużej dokładności przy pobieraniu próbek, ich ekstrakcji oraz analizie ilościowo – jakościowej. FDA ustaliła następujące, dopuszczalne poziomy DON w produktach rolnych: Poziom DON Rodzaj produktu Przeznaczenie produktu Żywność Bydło rzeźbe i opasowe oraz drób Świnie Pozostałe zwierzęta 1ppm (mąka,otręby,kiełki) 10 ppm 50 % w dawce (5 ppm w całej dawce) 5 ppm 20 % w dawce (1 ppm w całej dawce ) 5 ppm 40 % w dawce (2 ppm w całej dawce .) Produkty z pszenicy Wszystkie zboża i produkty pochodne . Wszystkie zboża i produkty pochodne Regulacje UE dla DON są następujące: Żywność Nieprzetworzone zboża inne niż pszenica durum, owies i kukurydza Nieprzetworzona pszenica durum i owies Mąka, włączając mąkę kukurydzianą, grys kukurydziany Chleb, Makarony, ciastka, płatki zbożowe i śniadaniowe Przetworzona żywność zbożowa dla niemowląt i dzieci oraz żywność dla dzieci Diagnostyka Rolno-Spożywcza Poziomy Maksymalne (ppb) 1250 1750 750 500 200 Sprzedaż i Serwis : +48 22 853 45 80/76 [email protected] Reveal Q+ for DON Zastosowanie testu Test Reveal Q+ DON jest stosowany do szybkiej ilościowej analizy zawartości DON w zbożach i produktach zbożowych takich jak: pszenica, jęczmień, kukurydza i owies. Kierowany jest do osób zajmujących się kontrolą Jakości produktów możliwie zanieczyszczonych DON. Zasada działania testu Test jest jednostopniowym paskowym testem immunochromatograficznym działającym na zasadzie konkurencyjnej techniki immunologicznej. Ekstrakt przenika do strefy z reagentami zawierającymi przeciwciała specyficzne dla DON skoniugowane z cząsteczkami złota. Jeżeli w badanej próbce obecny jest DON to w tej strefie wychwytywany jest przez kompleks przeciwciało-barwnik na skutek czego tworzy się nowy kompleks: DON + przeciwciało + barwnik. Z kolei ten kompleks przenika dalej do strefy membranowej, w której DON skonjugowany jest z nośnikiem białkowym. W tej strefie wszystkie nie związane przeciwciała specyficzne dla DON są wychwytywane, a cząstki barwne koncentrują się tworząc widoczną poprzeczną linię na pasku. Jeżeli w badanej próbce jest więcej DON to w większym stopniu będzie tworzył kompleksy ze specyficznymi przeciwciałami i cząsteczkami barwnymi, skutkiem czego mniej przeciwciał DON będzie wychwytywanych w strefie testowej paska. Z tego względu przy wyższej koncentracji DON w badanej próbce intensywność koloru na poprzecznej linii tworzącej się na pasku jest słabsza. Alogorytmy zaprogramowane w czytniku Reveal AccuScan™ III przeliczają intensywność tej linii na ilościowy wynik wyrażany w częściach na milion ppm (parts per milion = ppm). Membrana zawiera także strefę kontrolną, w której immuno kompleks znajdujący się w strefie reagentowej jest wychwytywany przez przeciwciała tworząc widoczną poprzeczną linię kontrolną. Kontrolna linia formuje się zawsze, niezależnie od poziomu zawartości DON w badanej próbce i wskazuje na prawidłowe działanie testu. Diagnostyka Rolno-Spożywcza Sprzedaż i Serwis : +48 22 853 45 80/76 [email protected] Reveal Q+ for DON Przechowywanie Zestaw należy przechowywać w temperaturze pokojowej (18 – 30C). Paski testowe należy przechowywać w oryginalnych zamkniętych pojemnikach, w celu zachowania ich optymalnych właściwości. Skład zestawu 25 pasków testowych Reveal Q+ 25 czerwonych probówek do rozcieńczeń 25 probówek na próbki 2 butelek z rozcieńczalnikiem do próbek Instrukcja użycia Materiały zalecane, nie znajdujące się w zestawie Destylowana lub dejonizowana woda Pojemniki do pobierania próbek z nakrywkami (Neogen nr kat. 9428) Młynek Agri Grind lub równorzędny (Neogen nr kat. 0401) Waga o możliwości odważenia 5-50 g 0,1g (Neogen nr kat. 9427) Stoper (Neogen nr kat.0426) Statyw na probówki Reveal Sample Cup Rack (Neogen nr kat. 9475) Czytnik Reveal AccuSan III (Neogen nr kat. 9590) Cylinder miarowy o pojemności 100 ml (Neogen nr kat.9447,9448) Strzykawka filtrująca lub filtr Whatman Nr.1 (Neogen nr kat. 9420) Pojemniki do zbierania ekstraktu z korkami (Neogen nr kat. 9421, 9421B) Pipeta 100l (Neogen nr kat. 9272, 9278) Końcówki do pipety 100l (Neogen nr kat.9410, 9417 lub 9407) Pipeta 500l lub 1000l (Neogen nr kat. 9335) Końcówki do pipety 200-1000l (Neogen nr kat.9464, 9487) Diagnostyka Rolno-Spożywcza Sprzedaż i Serwis : +48 22 853 45 80/76 [email protected] Reveal Q+ for DON Uwagi i zalecenia 1. Paski testowe muszą być przetrzymywane wewnątrz suchego oryginalnego opakowania. 2. Zestaw należy przechowywać w temperaturze pokojowej (18 – 30C). Nie zamrażać. 3. Nie stosować testu po upływie jego terminu ważności. 4. Wszystkie stosowane w teście płyny, w tym ekstrakty próbek, jak również sprzęt laboratoryjny należy traktować, jako zanieczyszczone DON. W czasie wykonywania testu należy stosować rękawiczki i odzież ochronną 5. W celu uniknięcia zanieczyszczenia krzyżowego, do każdej próbki należy stosować czysty sprzęt laboratoryjny i dokładnie myć szkło przed użyciem go do następnej próbki. Przygotowanie i ekstrakcja próbek Badane próbki powinny być pobrane zgodnie z zasadami przy pobieraniu próbek reprezentatywnych. 1. Uzyskać próbkę reprezentatywną. Zmielić pobraną próbkę do takiego stopnia, aby co najmniej 75% zmielonego materiału przechodziło przez sito o 20 mesh, tj. miało wygląd dobrze zmielonej kawy instant. 2. Ekstrakcję prowadzić w stosunku: 1 część próbki do 10 części wody destylowanej lub dejonizowanej. Na przykład, do 10 gramów próbki dodać 100 ml destylowanej lub dejonizowanej wody. Energicznie wytrząsać przez 3 minuty lub mieszać w mieszalniku szybkoobrotowym przez 1 minutę. Pozostawić do odstania i przefiltrować przez strzykawę filtrującą lub papierowy filtr. Tak przygotowaną próbkę poddać procedurze wykonywania testu. ALTERNATYWNIE: (W metodzie USDA/GIPSA) Zmieszać 50 gramów próbki z 250 ml wody i wytrząsać przez 3 minuty lub mieszać w mieszalniku szybkoobrotowym przez 1 minutę. Pozostawić próbkę do odstania, a następnie przefiltrować co najmniej 5ml przez strzykawę filtrującą lub przez filtr papierowy Whatman Nr.1 i zebrać filtrat. Rozcieńczyć ekstrakt próbki 1:2 (1+1) wodą destylowaną lub dejonizowaną (np., dodać 1 ml ekstraktu do 1 ml destylowanej lub dejonizowanej wody). Tak przygotowaną próbkę poddać procedurze wykonywania testu. Diagnostyka Rolno-Spożywcza Sprzedaż i Serwis : +48 22 853 45 80/76 [email protected] Reveal Q+ for DON Procedura wykonania testu 1. Wyjąć niezbędną ilość czerwonych probówek do rozcieńczeń i przezroczystych probówek na próbki. Umieścić je w stojaku. 2. Przy użyciu pipety i nowej końcówki wprowadzić po 1000l rozcieńczalnika do próbek do każdej probówki oznaczonej na czerwono. 3. Stosując nową końcówkę pipety do każdej próbki wprowadzić po 100l przefiltrowanych ekstraktów badanych próbek do każdej czerwonej probówki z rozcieńczalnikiem. Mieszać poprzez 5 krotne pipetowanie w górę i w dół. 4. Przenieść po 100l rozcieńczonego ekstraktu próbek do czystych przezroczystych probówek. 5. W każdej probówce umieścić pasek testowy Reveal Q+ DON, końcówką oznakowaną „sample” do dołu. Pozostawić pasek testowy w próbce przez 3 minuty. 6. Wyjąć pasek z próbówki po upływie czasu 3 minut. Odczyt wyników na czytniku Reveal AccuScan Testy powinny być odczytane w ciągu 1 minuty od zakończenia 3 minutowej inkubacji. Aby uzyskać dodatkowe informacje na temat ustawień należy udać się do Reveal AccuScan III Set Up. 1. Umieścić dokładnie pasek testowy Reveal Q+ w czarnym adapterze, najpierw strona „sample”, stroną z rezultatami skierowanymi na zewnątrz. 2. Umieścić adapter z testem, górną stroną skierowany w dół, w czytniku (linie testowe będą skierowane w dół czytnika). Po włożeniu adaptera zaświeci się zielone światełko czytnik rozpocznie automatycznie analizę testu. UWAGA: usunięcie adaptera z czytnika w trakcie odczytu może prowadzić do niewłaściwych odczytów. Diagnostyka Rolno-Spożywcza Sprzedaż i Serwis : +48 22 853 45 80/76 [email protected] Reveal Q+ for DON 3. Czytnik AccuScan III przeanalizuje pasek testowy a uzyskane rezultaty zostaną wyświetlone na ekranie oraz zapisane w pamięci czytnika. Uwagi 1. Należy upewnić się, że pasek testowy jest właściwie (całkowicie) umieszczony w adapterze. 2. Odczyty powinny być wykonane pomiędzy 3 a 4 minutą. Odczyty dokonane po czasie przekraczającym 4 minuty mogą być niedokładne z powodu nadmiernego rozwinięcia paska testowego. 3. Pasek testowy musi być odczytywany w czytniku Reveal AccuScan III Reader. Charakterystyka testu 1. Limit detekcji: 0,3 ppm 2. Zakres pomiarowy: 0,3 – 6 ppm UWAGA: aby oznaczyć zawartość DON na poziomie przekraczającym 6 ppm należy skontaktować się z serwisem technicznym. Zwalidowane matryce Jęczmień, kukurydza, kukurydziana mączka glutenowa*, DDGS*, słód jęczmienny, owies, pszenica, otręby pszenne i bielmo pszenicy. *wymaga zwykle korekcji pH. UWAGA: Neogen stale prowadzi walidację dla kolejnych produktów. W celu uzyskania aktualizacji prosimy o kontakt z firmą Noack Polen Sp. z o.o. Serwis klienta Noack Polen Sp. z o.o., ul. Królowej Marysieńki 50, 02-954 Warszawa, Tel. 22 853 45 80, fax. 22 853 77 26, [email protected] Diagnostyka Rolno-Spożywcza Sprzedaż i Serwis : +48 22 853 45 80/76 [email protected] Reveal Q+ for DON Dostępne informacje MSDS Materiały dotyczące bezpieczeństwa dla tego testu i wszystkich testów Neogenu są dostępne na stronie www.neogen.com/msds.html. Gwarancja Neogen nie daje żadnych gwarancji na żaden sposób, również wykorzystania lub wprowadzania, z wyjątkiem materiału, z którego produkty są wykonane, które mają standardową jakość. Jeżeli jakiekolwiek materiały są wadliwe, Neogen dostarczy produkt zastępczy. Kupujący ponosi całkowite ryzyko i odpowiedzialność za wyniki wynikające z użycia tego produktu. Nie ma gwarancji sprzedawalności tego produktu, zdolności użytkowej do różnych celów. Neogen nie powinien być odpowiedzialny za żadne uszkodzenia, włączając specjalne lub wynikające, lub koszty wynikające bezpośrednio lub pośrednio ze stosowania produktu. Diagnostyka Rolno-Spożywcza Sprzedaż i Serwis : +48 22 853 45 80/76 [email protected]