Amylase CP ABX Pentra

ABX Pentra
Amylase CP
ABX Pentra Amylase CP
Nr ref.: A11A01628
Objętość R1: 26 ml
Objętość R2: 6.5 ml
Odczynnik diagnostyczny do oznaczania in vitro
stężenia α-Amylazy w surowicy,
osoczu i moczu.
2008/10/10
A93A00042M PL
A11A01628
26 ml
6.5 ml
Zastosowania kliniczne (1,2)
α-amylazy to enzymy hydrolityczne, rozbijające skrobię na maltozę. W
ciele człowieka α-amylazy wytwarzane są przez kilka różnych organów:
amylaza trzustkowa wytwarzana jest przez trzustkę i uwalniana do jelit,
amylaza ślinowa jest syntezowana w gruczołach ślinowych i wydzielana
do śliny. Amylaza obecna we krwi jest z niej wyodrębniana przez nerki i
wydalana w moczu. Tak więc podwyższenie jej stężenia w surowicy krwi
pociąga za sobą wzrost jej zawartości w moczu.
Pomiar α-amylazy w surowicy i w moczu służy głównie diagnostyce
zaburzeń działania trzustki, a także pozwala wykryć rozwój ich
komplikacji. Przy ostrym zapaleniu trzustki, zawartość amylazy we krwi
wzrasta w ciągu kilku godzin po pojawieniu się bólu brzucha i osiąga
wartość szczytową po ok. 12 godzinach, powracając następnie do
wartości mieszczących się w zakresie normy najpóźniej po 5 dniach.
Specyficzność α-amylazy dla zaburzeń czynnościowych trzustki nie jest
zbyt wysoka, gdyż podwyższone poziomy tych enzymów można wykryć
także przy wielu schorzeniach nie obejmujących trzustki, przykładowo
przy zapaleniu ślinianek przyusznych i niewydolności nerek. Z tego
względu w celu potwierdzenia diagnozy ostrego zapalenia trzustki należy
dodatkowo wykonać pomiar poziomu lipaz.
Metoda stosowana w oznaczeniach
Enzymatyczny test fotometryczny, w którym 4,6-etyliden-(G7)-pnitrofenyl-(G1)-α-D-maltoheptaozyd (EPS-G7) jest rozszczepiany przez
α-amylazy na kilka różnych części. Części te są następnie hydrolizowane
przez α-glukozydazę, w wyniku czego powstaje glukoza i p-nitrofenol.
Wzrost absorbancji oznacza ogólną aktywność amylaz (zarówno
trzustkowych, jak i ślinowych) w badanej próbce (3,4).
α-amylaza
5 EPS-G7+5 H2O
2 etylideno-G5 + 2G2PNP + 2 etylideno-G4 + 2G3PNP +
etylideno-G3 + G4PNP
2 G2PNP + 2 G3PNP + G4PNP + 14 H2O
α-glukozydaza
5 PNP + 14 G
(PNP = p-nitrofenol, G = glukoza)
Odczynniki
ABX Pentra Amylase CP jest odczynnikiem gotowym do użycia.
Odczynnik 1:
pH 7,1
pH 7,1
0,1 mol/l
62,5 mmol/l
12,5 mmol/l
≥ 2,5 kU/l
< 1 g/l
0,1 mol/l
8,5 mmol/l
< 1 g/l
BP 7290
34184 Montpellier- cedex 4 - France
Odczynnika ABX Pentra Amylase CP należy używać zgodnie z niniejszą
ulotką. Firma HORIBA ABX nie może zagwarantować właściwego
działania odczynnika, jeśli zostanie on użyty w inny od podanego sposób.
Sposób użycia
Wyjmij obie zatyczki kasety. Jeżeli odczynnik zawiera pianę, usuń ją za
pomocą plastikowej pipety. Załóż odpowiednie zatyczki ochronne, nr ref.
GBM0969 na odczynniku R1 i nr ref. GBM0970 na odczynniku R2, po
czym umieść w chłodzonej komorze odczynnikowej analizatora ABX
Pentra 400.
Kalibrator
Do celów kalibracji należy używać:
ABX Pentra MultiCal, Nr ref. A11A01652 (do oddzielnego zakupu)
10 x 3 ml (liofilizat)
Kontrol
W celu przeprowadzenia wewnętrznej kontroli jakości użyj :
ABX Pentra N Control, Nr ref. A11A01653 (do oddzielnego zakupu)
10 x 5 ml (liofilizat)
ABX Pentra P Control, Nr ref. A11A01654 (do oddzielnego zakupu)
10 x 5 ml (liofilizat)
ABX Pentra Urine Control L/H, nr ref. A11A01674 (do oddzielnego
zakupu)
1 x 10 ml + 1 x 10 ml
Oznaczenie kontroli należy przeprowadzać raz dziennie i/lub po każdej
kalibracji.
Częstość przeprowadzania kontroli oraz przedziały ufności powinny być
ustalone w oparciu o laboratoryjne wytyczne oraz mające zastosowanie
w danym kraju przepisy. Wynik kontroli musi zawierać się w
zdefiniowanych normach. Każde laboratorium powinno wypracować
sposób postępowania, w przypadku gdy oznaczenia kontrolne nie będą
mieścić się w wyznaczonych normach.
Form-0846 Rev. 2
Odczynnik 2:
Bufor Gooda
NaCl
MgCl2
α-glukozydaza
Azydek sodu
Bufor Gooda
EPS-G7
Azydek sodu
HORIBA ABX
S.A.S. au capital de 41.700.000 € - RCS Montpellier 328 031 042 - SIRET 328 031 042 000 42 - APE 332 B
Najnowsza wersja dokumentacji dostępna jest na stronie: www.horiba-abx.com
ABX Pentra
Amylase CP
Wymagane komponenty niewchodzące w skład produktu
Wydajność przy użyciu w analizatorze ABX Pentra 400
• Zautomatyzowany kliniczny analizator biochemiczny
• ABX Pentra Clean-Chem CP, Nr ref. A11A01755, 30 ml
• Standardowy sprzęt laboratoryjny.
Dane przedstawione poniżej pochodzą z oznaczeń przeprowadzonych
przy użyciu analizatora ABX Pentra 400.
Próbka
Liczba oznaczeń: 125 oznaczeń
• Surowica krwi.
• Osocze heparynizowane.
• Mocz.
Stabilność przez:
Surowica/osocze: 7 dni
Mocz:
7 dni
1 rok
2 dni
10 dni
3 tygodnie
w temperaturze
w temperaturze
w temperaturze
w temperaturze
w temperaturze
w temperaturze
20 - 25 °C
4 - 8 °C
- 20 °C
20 - 25 °C
4 - 8 °C
- 20 °C
Zakres norm (4)
Surowica/osocze
Mocz
Surowica, osocze
Kobiety
< 100 U/l
< 447 U/l
Mężczyźni
< 100 U/l
< 491 U/l
Przechowywanie i data ważności
Odczynniki, w zamkniętych kasetach, są przydatne do użycia zgodnie z
datą ważności podaną na etykiecie, jeśli są przechowywane w
temperaturze
2-8°C,
niepoddane
działaniu
światła
ani
zanieczyszczeniom.
Stabilność po otwarciu: patrz sekcja „Wydajność przy użyciu w
analizatorze ABX Pentra 400”.
Nie wolno zamrażać odczynników.
Sposób przeprowadzania pomiaru
Opis sposobu przeprowadzania pomiarów przy użyciu urządzeń innych
niż analizator ABX Pentra 400 jest dostępny na życzenie klienta.
Postępowanie z odpadami
1. Proszę postępować zgodnie z lokalnymi regulacjami prawnymi.
2. Odczynnik zawiera środek konserwujący: azydek sodu (0,95 g/l).
Ponieważ azydek sodu może wchodzić w reakcje z ołowiem lub
miedzią tworząc wybuchowe azydki metali, odczynnik należy
wylewać do odpływu kanalizacyjnego spłukując obficie wodą.
Ogólne środki ostrożności
1. Niniejszy odczynnik jest przeznaczony wyłącznie do diagnostyki in
vitro.
2. Ślina i skóra zawierają α-amylazę, dlatego nie wolno pipetować
odczynników ustami i należy unikać ich kontaktu ze skórą.
3. Nie połykać. Unikać zanieczyszczenia skóry oraz błon śluzowych.
4. Podczas korzystania z odczynników w laboratorium należy
zachować odpowiednie środki ostrożności.
5. Kasety odczynnikowe kwalifikują się do utylizacji i należy je
utylizować zgodnie z lokalnymi przepisami.
6. Należy uważnie zapoznać się z kartą charakterystyki substancji
(MSDS) dołączoną do odczynnika.
S.A.S. au capital de 41.700.000 € - RCS Montpellier 328 031 042 - SIRET 328 031 042 000 42 - APE 332 B
Stabilność robocza odczynników:
Po otwarciu, kaseta z odczynnikiem umieszczona w chłodzonej komorze
analizatora ABX Pentra 400 zachowuje przydatność do użycia przez 60
dni.
Objętość próbki: 4.0 μl/test
Wykrywalność:
Wykrywalność ustalono zgodnie z zaleceniami procedury Valtec (5) i
wynosi ona 9 U/l.
Dokładność i precyzja:
• Powtarzalność (precyzja w trakcie pracy urządzenia)
Urządzenie przeprowadza dwudziestokrotnie oznaczenia dla 3 próbek o
niskim, średnim oraz wysokim stężeniu oraz dla 2 kontroli, zgodnie z
zaleceniami procedury Valtec (5).
Kontrola normalna
Kontrola patologiczna
Próbka 1
Próbka 2
Próbka 3
Średnia wartość U/l
81.7
206.2
69.0
151.8
383.6
CV %
1.47
0.91
1.18
1.23
1.32
• Odtwarzalność (precyzja powtarzania oznaczeń)
Urządzenie przez 20 dni (2 serie na dzień) przeprowadza podwójne
oznaczenia dla 3 próbek osocza o niskim, średnim i wysokim stężeniu
oraz dla 2 kontroli - zgodnie z procedurą EP5-A opracowaną przez
NCCLS (6).
Kontrola normalna
Kontrola patologiczna
Próbka 1
Próbka 2
Próbka 3
Średnia wartość U/l
86.80
209.40
52.80
148.70
389.60
CV %
2.30
1.79
5.29
4.14
2.50
Liniowość oraz zakres wartości pomiaru:
Liniowość odczynnika ustalono zgodnie z zaleceniami NCCLS, EP6-P (7).
Dolna granica liniowości: 13 U/l
Górna granica liniowości: 2000 U/l, z automatycznym rozcieńczeniem
następczym: 6000 U/l
Korelacja:
100 próbki pobrane od pacjentów koreluje się z dostępnym
odczynnikiem, służącym jako punkt odniesienia, zgodnie z zaleceniami
NCCLS, EP9-A2 (8).
Równanie dla otrzymanej linii allometrycznej wygląda następująco:
Y = 0.96 x + 2.46 dla współczynnika korelacji r2 = 0.9955.
Najnowsza wersja dokumentacji dostępna jest na stronie: www.horiba-abx.com
ABX Pentra
Amylase CP
Czynniki zakłócające:
Hemoglobina: Nie obserwuje się statystycznie istotnego wpływu do
209 μmol/l
Triglicerydy: Nie obserwuje się statystycznie istotnego wpływu do
7 mmol/l
Bilirubina
Nie obserwuje się statystycznie istotnego wpływu do
całkowita:
375 μmol/l
Bilirubina
Nie obserwuje się statystycznie istotnego wpływu do
bezpośrednia: 300 μmol/l
Stabilność kalibracji:
Odczynnik jest kalibrowany w dniu 0. Stabilność kalibracji jest
kontrolowana poprzez wykonanie testów na 2 próbkach kontrolnych.
Liniowość oraz zakres wartości pomiaru:
Liniowość odczynnika ustalono zgodnie z zaleceniami NCCLS, EP6-P (7).
Dolna granica liniowości: 4.92 U/l
Górna granica liniowości: 2000 U/l, z automatycznym rozcieńczeniem
następczym: 6000 U/l
Korelacja:
109 próbki pobrane od pacjentów koreluje się z dostępnym
odczynnikiem, służącym jako punkt odniesienia, zgodnie z zaleceniami
NCCLS, EP9-A2 (8).
Równanie dla otrzymanej linii allometrycznej wygląda następująco:
Y = 0.94 x + 0.21 przy współczynniku korelacji r2 = 0.99.
Czynniki zakłócające:
Stabilność kalibracji wynosi co najmniej 10 dni.
Hemoglobina: Nie obserwuje się statystycznie istotnego wpływu do 278 μmol/l
Uwaga: Ponowną kalibrację odczynnika zaleca się w przypadku zmiany
jego serii oraz w przypadku, gdy wyniki kontroli jakości wykroczą poza
założony zakres.
Stabilność kalibracji:
Odczynnik jest kalibrowany w dniu 0. Stabilność kalibracji jest
kontrolowana poprzez wykonanie testów na 2 próbkach kontrolnych.
Wersja aplikacjia: 10.xx
Stabilność kalibracji wynosi co najmniej 10 dni.
Mocz
Uwaga: Ponowną kalibrację odczynnika zaleca się w przypadku zmiany
jego serii oraz w przypadku, gdy wyniki kontroli jakości wykroczą poza
założony zakres.
Liczba oznaczeń: 125 oznaczeń
Wersja aplikacji: 7.xx
Stabilność robocza odczynników:
Po otwarciu, kaseta z odczynnikiem umieszczona w chłodzonej komorze
analizatora ABX Pentra 400 zachowuje przydatność do użycia przez 60
dni.
Objętość próbki: 4.0 μl/oznaczenie
Dokładność i precyzja:
• Powtarzalność (precyzja w trakcie pracy urządzenia)
Urządzenie przeprowadza dwudziestokrotnie oznaczenia dla 3 próbek o
niskim, średnim oraz wysokim stężeniu oraz dla 2 kontroli, zgodnie z
zaleceniami procedury Valtec (5).
Średnia wartość U/l
44.72
169.38
86.35
157.73
286.80
CV %
3.16
1.14
1.65
0.63
0.63
• Odtwarzalność (precyzja powtarzania oznaczeń)
Urządzenie przez 20 dni (2 serie dziennie) przeprowadza oznaczenia dla
2 podwójnych kontroli zgodnie z zaleceniami NCCLS, procedura EP5-A
(6).
Kontrola normalna
Kontrola patologiczna
Średnia wartość U/l
46.26
163.00
Użytkownik ma obowiązek sprawdzić, czy niniejszy dokument dotyczy
używanego odczynnika.
Bibliografia
Wykrywalność:
Wykrywalność ustalono zgodnie z zaleceniami procedury Valtec (5) i
wynosi ona 4.92 U/l.
Kontrola normalna
Kontrola patologiczna
Próbka 1
Próbka 2
Próbka 3
Ostrzeżenie
CV %
5.24
2.94
1. Lorentz K. α-Amylase. In: Thomas L, editor. Clinical laboratory
diagnostics. 1rd ed. Philadelphia: TH-Book Verlagsgesellschaft ;
1998. p.192-202.
2. Moss DW, Henderson AR. Digestive enzymes of pancreatic origin.
In: Burtis CA, Ashwood ER, editors. Tietz Textbook of Clinical
Chemistry. 3rd ed. Philadelphia: W.B Saunders Company; 1999.
p.689-698.
3. Kruse-JarresJD,KaiserC,Hafkenscheid JC, Hohenwallner W, SteinW.,
Bohner J et al. Evaluation of a new alpha-amylase assay using 4,6ethylidene-(G7)-1-4-nitrophenyl-(G1)-alpha,D-maltoheptaoside
as
substrate. J. Clin. Chem. Biochem. 1989; 27:103 - 113.
4. Junge W, Wortmann W, Wilke B, Waldenstroem J et al. Development
and evaluation of assays for determination of total and pancreatic
amylase at 37°C according to the principle recommended by the
IFCC. Clin Biochem 2001; 34:607-15.
5. Vassault A., Grafmeyer D. Naudin C. et al., Protocole de validation
de techniques (document B), Ann. Biol. Clin., 1986, 44, 686-745.
6. Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry Devices,
Approved Guideline, NCCLS document EP5-A, Vol. 19, No. 2,
february 1999.
7. Evaluation of the Linearity of Quantitative Analytical Methods,
Proposed Guideline, NCCLS document EP6-P, Vol. 6, No. 18,
september 1986.
8. Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples, Approved
Guideline, 2nd ed., NCCLS document EP9-A2, Vol. 22, No. 19, 2002.
a. Modyfikacja indeksu od L do M: nowa wersja aplikacji.
S.A.S. au capital de 41.700.000 € - RCS Montpellier 328 031 042 - SIRET 328 031 042 000 42 - APE 332 B
Najnowsza wersja dokumentacji dostępna jest na stronie: www.horiba-abx.com
ABX Pentra
Amylase CP
S.A.S. au capital de 41.700.000 € - RCS Montpellier 328 031 042 - SIRET 328 031 042 000 42 - APE 332 B
Najnowsza wersja dokumentacji dostępna jest na stronie: www.horiba-abx.com