raport mikrobiologiczny

Ghent, 12 czerwca 2006
Tłumaczenie z angielskiego
Sprawozdanie z testów mikrobiologicznych na roztoczy kurzu domowego
W strukturze R&D strategii rozwoju preparatów probiotycznych (PIP), LabMET wykonał liczne testy mikrobiologiczne, by
zweryfikować wpływ działalności sporów bakterii na roztoczy kurzu domowego. Trzy typy eksperymentów zostały
wykonane w tryplikacie i zostały przedstawione poniżej.
1) Wpływ działalności sporów bakterii PIP na roztoczy kurzu domowego
Oplombowane i wywietrzone plastykowe pojemniki, dostarczone z tekstylną ściółką, zostałe zaszczepione roztoczmi
kurzu domowego i dojrzewane w temp. 28°C przy wilgoci 70%. Żaden dodatkowy pokarm nie został dodany. Pojemniki
były poddanie działaniu preparatu PIP, zostałe wykonane po prawej stronie pół tekstylnej powierzchni, z inną połową
potraktowaną równą ilością sterylnej wody. Wyniki były następujące:
Pojemnik 1: Kontrolny (Iewa i prawa strona potraktowana wodą)
Pojemnik 2: Codzienne stosowanie na prawej stronie preparatem PIP (przez 8 dni)
Pojemnik 3: 72 godzinnego stosowanie na prawej stronie preparatem PIP (przez 2 tygodnie)
Pojemnik 4: Tygodniowe stosowanie na prawej stronie preparatem PIP (przez 3 tygodnie)
Wyniki:
Pojemnik 1: Dane są uśrednione z trzech identycznych eksperymentów. Żadna znacząca rozbieżność nie była otrzymana
między liczbą roztoczy kurzu na obu połowach powierzchni. To wskazuje, że bez poddania działania, roztocza kurzu
migrują przypadkowo na obu połowach powierzchni. Drobny wzrost w absolutnych liczbach roztoczy kurzu też jako
wskaźnik, że brak uzupełnienia pokarmu nie jest negatywny dla populacji. Rys 1 przedstawia wyniki ilości roztoczy kurzu
w pojemniku 1.
Rys 1: Kontrolny (pojemnik bez zastosowania preparatu PIP)
Lewa strona wypertraktowana wodą
Prawa strona wypertraktowana wodą
Rys 2: Codzienne stosowanie produktu PIP
Woda
PIP
Pojemnik 2 : Codzienne stosowanie produktu PIP
zaprowadziło do znaczącego zmniejszenia ilości roztoczy
kurzu na potraktowanej połowie powierzchni. Znów, drobny
wzrost na nieleczonej stronie został zauważony, jednakże,
sumaryczna ilość roztoczy kurzu na całkowitej powierzchni
niżej został porównywalny do kontrolnego, wskazując możliwy
nacisk na powielanie roztoczy kurzu będącej skutkiem
produktu PIP. Wyniki są przedstawione na rys. 2.
Rys 3: 72h stosowanie produktu PIP
Woda
PIP
Pojemnik 3: Stosowanie każde 3 dni pokazało niższy poziom
roztoczy kurzu potraktowanej połowy powierzchni po 2
tygodniach; dane bazowały na trzech eksperimentach te wyniki
nie są znaczące. Rys 3 przedstawia wyniki.
Rys 4: Tygodniowe stosowanie produktu PIP
Woda
PIP
Pojemnik 4: Tygodniowe stosowanie nie skończyło się
jakimś znaczącym skutkiem na rozpowrzechnieniu roztoczy
kurzu jak przedstawia rys 4.
Wniosek: Na powyższych skutkach to może zostać
zakończone, że produkt PIP skutkuje w odtrącaniu roztoczy
kurzu kiedy miał zastosowanie na codziennej podstawie.
Obniżając częstości leczenia po początkowej intensywnej
dawce może skończyć się zlikwidowaniem populacji roztoczy
kurzu.
2) Degeneracja odchodów
Drugie próby zweryfikowały, czy zformowane spory bakterii w produkcie PIP są w stanie się aby urosnąć na
kałowym ekstrakcie roztoczy kurzu. Te fragmenty zostały otrzymane do usuwania roztoczów kurzu od 1-tygodniowej
kolonii w pojemniku bez dodatkowego pokarmu i zawieszając pozostawanymi frakcjami w pojemniku. Ta zawiesina
została homogenizowana i wysterylizowana przez filtr, mający w sobie jego dodatek jako pożywne źródło do wodnistej
zawiesiny sporów tworzącej bakterie produktu PIP. Ustalenie ilości bakterii po 72 godzinach zostało wykonane za
pomocą płytki Nutrient Agar w 37°C. Porównanie było zrobione z kontrolnym, gdzie sterylny fiziologiczny roztwór
zamiast kałowego fragmentu został dodany do bakteryjnej zawiesiny.
Wynik: Jak przedstawione na rys.5, bakterii PIP są w
stanie, urosnąć na kałowym fragmencie roztoczy kurzu. Nawet
na 10 - krotnie rozpuszczonym fragmencie doprowadziło do
znaczącego wzrostu bakterii.
Rys 5: Bakteryjny wzrost na kałowym fragmencie roztoczy
kurzu
1. Kontrolny;
2. 10 - krotnie rozpuszczony kałowy fragment;
3. fragment fekalii jako taki
Wniosek: Powyższy wynik wzrostu bakterii w produkcie PIP przedstawia, że są w stanie do rozrostu i trawienia
odchodów roztoczy kurzu.
3) Biobójcze działanie
Wykorzystując przepływową metodę liczenia żywych i martwych komórek, określić czy przesączona ciecz w ciągu
48h przez zawiesinę bakterii preparatu PIP zdolna do zlikwidowania Staphylococcusaureus i Streptococcusfaecalis.
Wyniki: Żywe / martwe ilości komórek S. faecalis i S. aureus są przedstawione w tabl 1.
Tabl 1: Sprawdzenie żywotności Streptococcus faecalis i Staphylococcus aureas zostały ustalone za pomocą
metody odnoszącej się do procesów środków biobójczych przez produkt PIP.
Kontrolna próbka: Streptococcus faecalis
Żywe
Martwe
Suma
Żywe (%)
Matrwe (%)
9317
9342
9311
18
25
12
9335
9367
9323
99,81
99,73
99,87
0,19
0,27
0,13
Streptococcus faecalis + odfiltrowane bakterii
Żywe
Martwe
Suma
Żywe (%)
Matrwe (%)
9338
95
9433
98,99
1,01
9365
9349
43
45
9408
9394
99,54
99,52
0,46
0,48
Kontrolna próbka: Straphytococcus aureus
Straphylococcus aureus + odfiltrowane
bakterii
Żywe
Martwe
Suma
Żywe (%)
Matrwe (%)
8925
7
8932
99,92
0.08
8846
8868
13
12
8859
8880
99,85
99,86
0.15
0,14
Żywe
Martwe
Suma
Żywe (%)
Matrwe (%)
9677
40
9717
99,59
0,41
9635
9629
23
28
9658
9657
99,76
99,71
0,24
0,29
Wniosek: Żadnego działania produktu PIP, odnoszącego się do właściwości środków biobójczych na
testowanych bakteriach nie zostało stwierdzone.
Ogólny wniosek: Przy wystarczającej częstotliwości aplikowania, produkt PIP był w stanie, zmniejszyć ilość
roztoczy kurzu na potraktowanej powierzchni. Dalsze wyniki wskazują, że kał roztoczy kurzu wykorzystywany jako
pożywne źródło dla bakterii preparatu. W rezultacie przy stosowaniu preparatu PIP obniżają się objawy alergii
spowodawanej przez roztoczy kurzu. Żadnych procesów odnoszących się właściwości środków biobójczych w produkcie
PIP w stosunku do Streptococcus i Staphylococcus nie był zarejestrowany.