ABX Pentra CK NAC CP

2010/07/13
A93A01240BPL
Chemia kliniczna
A11A01632
26 mL
ABX Pentra
CK NAC CP
6.5 mL
■ Pentra C200
Zastosowanie: Odczynnik diagnostyczny do oznaczania ilościowego in vitro
stężenia całkowitej kinazy kreatynowej (CK) w surowicy lub osoczu krwi
metodą kolorymetryczną.
Aspekty kliniczne (1, 2)
Kinaza kreatynowa (CK) jest enzymem, który składa się z
izoenzymów, głównie pochodzenia mięśniowego (CK-M) i
mózgowego (CK-B). CK występuje w surowicy krwi w
postaci dimerycznej, jako CK-MM, CK-MB, CK-BB oraz
jako makroenzym. Podwyższony poziom CK obserwuje
się w chorobach mięśnia sercowego oraz mięśni
szkieletowych. Oznaczenia poziomu CK dokonuje się
szczególnie w połączeniu z CK-MB, w celu
zdiagnozowania i monitorowania zawału mięśnia
sercowego.
Metoda (3, 4, 5, 6, 7)
Historia: metoda do oznaczania aktywności kinazy
kreatynowej (CK) przy zastosowaniu sprzężonych reakcji
enzymatycznych została pierwotnie opisana przez Oliver
(3) a następnie zmodyfikowana przez Rosalky (4).
DGKC (Niemieckie Towarzystwo Chemii Klinicznej, 5)
oraz IFCC (Międzynarodowa Federacja Chemii Klinicznej,
6) unormowały tę metodę, zalecając tym samym zwrotne
utlenienie CK i jego aktywację przy zastosowaniu nacetylocysteiny (NAC). W 2002 r. IFCC potwierdziła
właściwość tej metody i rozszerzyła ją do 37°C (7), i jest to
właśnie metoda zastosowana w niniejszym dokumencie:
Zoptymalizowany test z detekcją UW, zgodnie z
zaleceniami DGKC (5) i IFCC (7) dla CK z inhibicją
izoenzymu CK-M przy zastosowaniu przeciwciał
poliklonalnych.
CK
Fosforan kreatyny + ADP <——> Kreatyna + ATP
HK
Glukoza + ATP <——> Glukozo-6-fosforan + ADP
Odczynniki
ABX Pentra CK NAC CP jest odczynnikiem gotowym do
użycia.
Odczynnik 1:
Imidazol pH 6,7
62,5 mmol/L
Glukoza
27,5 mmol/L
N-Acetylocysteina (NAC)
27,5 mmol/L
Octan magnezu
13,8 mmol/L
EDTA-Na2
2,1 mmol/L
NADP
2,75 mmol/L
Heksokinaza (HK)
≥ 3 kU/L
Azydek sodu
< 1 g/L
Odczynnik 2:
Imidazol
160 mmol/L
Fosforan kreatyny
170 mmol/L
EDTA-Na2
2,1 mmol/L
ADP
11 mmol/L
AMP
28 mmol/L
Diadenozynopentafosforan
56 µmol/L
Dehydrogenaza glukozo-6-fosforanowa (G6P-DH) ≥ 7,5 kU/L
Azydek sodu
< 1 g/L
ABX Pentra CK NAC CP należy używać zgodnie z
niniejszą ulotką. Producent nie może zagwarantować
właściwego działania produktu, jeśli zostanie on użyty w
sposób inny od podanego.
Form-0846 Rev.4
G6P-DH
Glukozo-6-fosforan + NADP+ <——>
Glukoniano-6-fosforan + NADPH + H+
(CK = kinaza kreatynowa, HK = heksokinaza, G6P-DH =
dehydrogenaza glukozo-6-fosforanowa)
S.A.S. au capital de 41.700.000 € - RCS Montpellier 328 031 042 - SIRET 328 031 042 000 42 - APE 332 B
Najnowsza wersja dokumentacji dostępna jest w: www.horiba.com
Chemia kliniczna
ABX Pentra
CK NAC CP
Postępowanie z preparatem
1. Wyjmij obie zatyczki kasety.
2. Jeżeli odczynnik zawiera pianę, usuń ją za pomocą
plastikowej pipety.
3. Umieść kasetę w chłodzonej komorze odczynnikowej
analizatora Pentra C200.
■ Osocze pobrane z heparyną litową.
Stabilność (8):
1 tydzień
w temperaturze 2-8°C
1 dzień
w temperaturze 15-25°C
4 tyg.
w temperaturze - 20°C (bez dostępu
światła)
Kalibrator
Zakres norm
Do celów kalibracji należy używać:
ABX Pentra Multical, Nr ref. A11A01652 (do oddzielnego
zakupu)
10 x 3 mL (liofilizat)
Każde laboratorium powinno wypracować swoje własne
zakresy odniesienia. Wartości podane w niniejszej ulotce
mają wyłącznie charakter orientacyjny.
Kontrola
Dorośli: (7) 37°C
Kobiety:
≤ 145 U/L
Mężczyźni: ≤ 171 U/L
Do wewnętrznej kontroli jakości należy używać:
ABX Pentra CK Control, nr ref. A11A01786 (wymaga
osobnego zakupu)
4 x 3 mL (liofilizat)
ABX Pentra N Control, nr ref. A11A01653 (wymaga
osobnego zakupu)
10 x 5 mL (liofilizat)
ABX Pentra P Control, nr ref. A11A01654 (wymaga
osobnego zakupu)
10 x 5 mL (liofilizat)
Oznaczenie kontroli powinno być przeprowadzane raz
dziennie i/lub po wykonaniu kalibracji.
Częstość przeprowadzania kontroli oraz przedziały ufności
powinny być ustalone w oparciu o wytyczne laboratoryjne
oraz przepisy obowiązujące w danym kraju. Wynik kontroli
musi zawierać się w zdefiniowanych przedziałach ufności.
Każde laboratorium powinno wypracować sposób
postępowania w przypadku, gdy wyniki wykroczą poza
wyznaczone przedziały.
Dzieci: (1)
Krew pępowinowa:
Noworodki:
≤ 5 dni:
< 6 mies.:
> 6 mies.:
Wymagane komponenty niewchodzące w
skład produktu
Dla
zainteresowanych
dostępne
są
instrukcje
przeprowadzania
oznaczeń
na
systemach
zautomatyzowanych innych niż Pentra C200 (niedostępne
w Stanach Zjednoczonych).
■ Zautomatyzowany kliniczny analizator biochemiczny:
Pentra C200
■ Kalibrator: ABX Pentra Multical, nr ref. A11A01652
■ Kontrole:
ABX Pentra CK Control, nr ref. A11A01786, i
ABX Pentra N Control, nr ref. A11A01653
ABX Pentra P Control, nr ref. A11A01654
■ Standardowy sprzęt laboratoryjny
37°C
175 - 402
468 - 1200
195 - 700
41 - 330
24 - 229
Przechowywanie i stabilność
W nieotwieranych kasetach, odczynniki zachowują
stabilność do upływu terminu podanego na etykiecie, o ile
są przechowywane szczelnie zamknięte w temperaturze
2-8°C oraz chronione przed zanieczyszczeniem.
Stabilność po otwarciu: patrz rozdział pt. „Wydajność przy
użyciu w analizatorze Pentra C200”.
Nie wolno zamrażać odczynników.
Sposób przeprowadzania pomiaru
Uszkodzenie opakowania
W przypadku zniszczenia opakowania ochronnego, nie
należy używać odczynnika, jeżeli uszkodzenie mogło
wpłynąć na jego właściwości.
Rodzaje próbek
■ Surowica.
S.A.S. au capital de 41.700.000 € - RCS Montpellier 328 031 042 - SIRET 328 031 042 000 42 - APE 332 B
Najnowsza wersja dokumentacji dostępna jest w: www.horiba.com
Chemia kliniczna
ABX Pentra
CK NAC CP
Postępowanie z odpadami
■ Należy postępować zgodnie z lokalnie obowiązującymi
przepisami.
■ Opisywany odczynnik jest konserwowany azydkiem
sodu, obecnym w stężeniu poniżej 0,1%. Azydek sodu
może wchodzić w reakcje z ołowiem lub miedzią,
tworząc wybuchowe azydki metali.
Ogólne środki ostrożności
■ Niniejszy odczynnik jest przeznaczony wyłącznie do
profesjonalnej diagnostyki in vitro.
■ Nie połykać. Unikać zanieczyszczenia skóry i błon
śluzowych.
■ Korzystając z niej, należy stosować standardowe
laboratoryjne środki ostrożności.
■ Kasety odczynnikowe są kasetami jednorazowego
użytku, należy je utylizować zgodnie z lokalnymi
przepisami.
■ Należy uważnie zapoznać się z kartą charakterystyki
(MSDS) dołączoną do odczynnika.
■ Nie używać produktu, jeżeli można zaobserwować
zmianę jego cech biologicznych, chemicznych lub
fizycznych, co wskazuje na jego nieprzydatność do
użytku.
Wydajność przy użyciu w analizatorze
Pentra C200
Dane przedstawione poniżej pochodzą z oznaczeń
przeprowadzonych przy użyciu analizatora Pentra C200.
Liczba oznaczeń: ok. 121
Wartość średnia
U/L
CV %
Próbka kontrolna 1
147
0,78
Próbka kontrolna 2
486
0,84
Próbka 1
55
1,73
Próbka 2
98
0,95
Próbka 3
344
0,77
■ Powtarzalność (precyzja całkowita)
Urządzenie przez 20 dni przeprowadza podwójne
oznaczenia dla 3 próbek osocza o niskim, średnim i
wysokim stężeniu oraz dla 2 kontroli (2 serie dziennie),
zgodnie z zaleceniami CLSI (NCCLS), procedura EP5-A2
(11).
Wartość średnia
U/L
CV %
Próbka kontrolna 1
158,70
5,28
Próbka kontrolna 2
510,96
4,04
Próbka 1
54,89
5,39
Próbka 2
98,94
4,81
Próbka 3
427,77
3,38
Zakres pomiaru:
Analiza potwierdziła zakres pomiaru od od 11 do
1500 U/L, z automatycznym rozcieńczeniem następczym
do 4500 U/L.
Liniowość odczynnika ustalono zgodnie z zaleceniami
CLSI (NCCLS), procedura EP6-A na 1500 U/L (12).
Korelacja:
Granica oznaczalności:
133 próbek (surowica) pobranych od pacjentów koreluje
się z komercyjnie dostępnym odczynnikiem, służącym
jako wzorzec, zgodnie z zaleceniami CLSI (NCCLS),
procedura EP9-A2 (13). Wartości zawierały się w
granicach od od 22 do 1327 U/L.
Równanie dla otrzymanej linii allometrycznej (regresja
Passing Bablock) (14) wygląda następująco:
Y = 1,00 X + 0,00 (U/L)
przy współczynniku korelacji r2 = 0,9962
Granicę oznaczalności określono zgodnie z zaleceniami
CLSI (NCCLS), procedura EP17-A (9) i wynosi ona 11 U/L.
Czynniki zakłócające:
Dokładność i precyzja:
Hemoglobina:
Stabilność robocza odczynników:
Po otwarciu, kaseta z odczynnikiem umieszczona w
chłodzonej komorze analizatora Pentra C200 zachowuje
stabilność przez 55 dni.
Objętość próbki: 6 µL/oznaczenie
■ Powtarzalność (precyzja w trakcie pracy urządzenia)
Urządzenie przeprowadza 20 razy oznaczenia dla 3
próbek o niskim, średnim oraz wysokim stężeniu oraz dla
2 kontroli, zgodnie z zaleceniami procedury Valtec (10).
S.A.S. au capital de 41.700.000 € - RCS Montpellier 328 031 042 - SIRET 328 031 042 000 42 - APE 332 B
Triglicerydy:
Nie obserwuje się statystycznie
istotnego wpływu do 100 µmol/L
(172 mg/dL).
Nie obserwuje się znaczącego wpływu
do 7 mmol/L (612,5 mg/dL) (jako
intralipid®, świadczący o lipemii).
Najnowsza wersja dokumentacji dostępna jest w: www.horiba.com
Chemia kliniczna
ABX Pentra
CK NAC CP
Bilirubina
całkowita:
Nie obserwuje się statystycznie
istotnego wpływu do 25 µmol/L
(1,5 mg/dL).
Bilirubina
Nie obserwuje się statystycznie
bezpośrednia:
istotnego wpływu do 360 µmol/L
(21,1 mg/dL).
Young podaje także inne ograniczenia, a w szczególności
listę leków oraz zmiennych przedanalitycznych, które
według obecnego stanu wiedzy wpływają na wyniki tej
metody (15, 16).
6.
7.
Stabilność kalibracji:
Odczynnik jest kalibrowany w dniu 0. Stabilność kalibracji
jest kontrolowana przez wykonanie testów na 2 próbkach
kontrolnych.
Stabilność kalibracji wynosi 28 dni.
Uwaga: Ponowną kalibrację odczynnika zaleca się w
przypadku zmiany jego serii oraz w przypadku, gdy wyniki
kontroli jakości wykroczą poza założony zakres.
Wersja
8.
9.
10.
aplikacjia :
01.xx
11.
Ostrzeżenie
12.
Użytkownik ma obowiązek sprawdzić, czy niniejszy
dokument dotyczy używanego odczynnika.
13.
Bibliografia
1.
2.
3.
4.
5.
Stein W. Creatine kinase (total activity), creatine
kinase isoenzymes and variants. In: Thomas L, ed.
Clinical laboratory diagnostics. Frankfurt: TH-Books
Verlagsgesellschaft (1998): 71-80.
Moss DW, Henderson AR. Clinical enzymology. In:
Burtis CA, Ashwood ER, editors. Tietz Textbook of
Clinical Chemistry. 3rd ed. Philadelphia: W.B
Saunders Company (1999): 617-721.
Oliver JT. A spectrophotometric method for the
determination of creatine phosphokinase and
myokinase. Biochem. J. (1955) 61: 116-122 .
Rosalky SB, J. Lab. Clin. Med. (1967) 69: 696-705.
Recommendations of the German Society for Clinical
Chemistry. Standardization of methods for the
estimation of enzyme activities in biological fluids:
Standard method for the determination of creatine
kinase activity. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. (1977)
15: 255-260.
a Modyfikacja
14.
15.
16.
Horder M, Elser RC, Gerhardt M and al. Approved
Recommendation on IFCC Methods for the
Measurement of Catalytic Concentration of Enzymes.
Part 7. IFCC Method for Creatine Kinase. Eur. J. Clin.
Chem. Clin. Biochem. (1991) 29: 435-456.
Schumann G, Bonora R, Ceriotti F, Férard G et al.
IFCC Primary Reference Procedures for the
Measurement of Catalytic Activity Concentrations of
Enzymes at 37°C; Part 5: Reference procedure for
the measurement of catalytic concentration of
creatine kinase. Clin. Chem. Lab. Med. (2002) 40:
635-642.
Guder WG, Zawta B. The Quality of Diagnostics
Samples. Samples: From the Patient to the
Laboratory. 1st ed. Guder W.G., Narayanan S., Zawta
B. (WHILEY-VCH, Darmstadt, Germany) (2001): 24.
Protocols for determination of limits of detection and
limits of quantitation. Approved Guideline, CLSI
(NCCLS) document EP17-A (2004) 24 (34) .
Vassault A, Grafmeyer D, Naudin C et al. Protocole
de validation de techniques (document B). Ann. Biol.
Clin. (1986) 44: 686-745.
Evaluation of Precision Performance of Quantitative
Measurement Method. Approved Guideline, CLSI
(NCCLS) document EP5-A2 (2004) 24 (25).
Evaluation of the Linearity of Quantitative Analytical
Methods. Approved Guideline, CLSI (NCCLS)
document EP6-A (2003) 23 (16).
Method Comparison and Bias Estimation Using
Patient Samples. Approved Guideline, 2nd ed., CLSI
(NCCLS) document EP9-A2 (2002) 22 (19) .
Passing H, Bablock W. A new biometrical procedure
for testing the equality of measurements from two
different analytical methods. J. Clin. Chem. Clin.
Biochem. (1983) 21: 709-20.
Young DS. Effects of Drugs on Clinical Laboratory
Tests. 4th Edition, Washington, DC, AACC Press
(1997) 3: 143-163.
Young DS. Effects of Preanalytical Variables on
Clinical Laboratory Tests. 2nd Edition, Washington,
DC, AACC Press (1997) 3: 120-132.
indeksu od A do B: Dodanie mniejszego indeksu.
S.A.S. au capital de 41.700.000 € - RCS Montpellier 328 031 042 - SIRET 328 031 042 000 42 - APE 332 B
Najnowsza wersja dokumentacji dostępna jest w: www.horiba.com