1. Monitorowanie oporności typu KPC

Monitorowanie oporności typu KPC (Klebsiella pneumoniae
carbapenemase) pałeczek Enterobacteriaceae w badaniach
przesiewowych pacjentów hospitalizowanych.
A. Bańska*, E. Zawidzka*, A. Kaczmarek**, E. Wilk*
* Pracownia Mikrobiologii ALAB laboratoria Sp. z o.o. Warszawa,
[email protected]
** Szpital Praski p.w. Przemienienia Pańskiego, Warszawa
Drobnoustroje wytwarzające karbapenemazy typu KPC są oporne na wszystkie leki β-laktamowe (w tym karbapenemy). Ponadto są one z
reguły oporne na leki innych grup stosowane wobec Enterobacteriaceae. Geny odpowiedzialne za wytwarzanie karbapenemaz typu KPC
umiejscowione są w obrębie plazmidów, co powoduje łatwość ich rozprzestrzeniania zarówno wewnątrz jak i międzygatunkowego. Szczepy
dysponujące takim mechanizmem oporności stanowią więc poważne zagrożenie epidemiologiczne. Przy okazji szeroko zakrojonych badań
epidemiologicznych prowadzonych przez zespół kontroli zakażeń w Szpitalu Praskim w Warszawie przeprowadzono analizę skuteczności
zastosowania podłoży chromogennych do szybkiej identyfikacji szczepów KPC+.
Metody:
Próbki wysiewano redukcyjnie na podłoże
CHROMagar KPC (GRASO) i równolegle na
podłoże chromogenne CPS ID3 (bioMerieux).
Wszystkie szczepy, które wyrosły na podłożu
Chromagar KPC identyfikowano do gatunku przy
użyciu pasków Api 10S (bioMerieux).
Wrażliwość izolatów na karbapenemy
(imipenem, meropenem, ertapenem) oceniano
metodą krążkową. Mechanizm oporności typu
KPC sprawdzano fenotypowo stosując test
kombinowany z kwasem boronowym (test
fenotypowy KPC) zalecany przez Krajowy
Ośrodek Referencyjny ds. Lekowrażliwości
(KORDL) polegający na wykryciu synergizmu
działania antybiotyku i inhibitora KPC.
Kontrolnie oceniano wrażliwość na karbapenemy
szczepów Klebsiella pneumoniae, które wyrosły
na podłożu CPS ID3, przy braku ich wzrostu na
podłożu CHROMagar KPC.
Cel pracy:
Ocena skuteczności podłoża
CHROMagar KPC (GRASO) w
badaniach przesiewowych pacjentów
hospitalizowanych celem wykrycia lub
wykluczenia obecności szczepów KPC.
Materiał:
Wymazy z odbytu pobrano
jednocześnie od 253 osób
hospitalizowanych na oddziałach:
chirurgii, chorób wewnętrznych,
ginekologii, ortopedii, urologii,
OIOM,
Wyniki:
W badaniu uzyskano wzrost
bakterii na podłożu
CHROMagar KPC z 7
badanych próbek. Identyfikacja
biochemiczna potwierdziła
przynależność wszystkich
izolatów do gatunku Klebsiella
pneumoniae. Wszystkie szczepy
były oporne na karbapenemy i
dały pozytywny wynik w teście
kombinowanym z kwasem
boronowym. Szczepy przesłano
do KORDL celem
potwierdzenia wykrytego
mechanizmu oporności. W
każdym przypadku uzyskano
potwierdzenie w badaniu na
obecność KPC zarówno w
metodzie fenotypowej jak i
genetyczno-molekularnej.
Szczepy Klebsiella
pneumoniae, które wyrosły na
podłożu CPS, przy braku
wzrostu na podłożu
CHROMagar KPC były
wrażliwe na karbapenemy.
CHROMagar KPC
(GRASO)
szczep I / szczep II
CPS ID3
(bioMerieux)
Próbka
CHROMagar KPC
api 10S
(wszystkie izolaty)
CPS ID3
api 10S
(izolaty z grupy KES, które
nie wyrosły na posianym
równolegle podłożu CHROMagar KPC)
Test fenotypowy KPC
Test fenotypowy KPC
(dla szczepów
Klebsiella pneumoniae)
Wyniki uzyskane z 253 badanych próbek
Oznaczenie
Wynik
Potwierdzenie
Liczba izolatów Klebsiella
pneumoniae
20
api 10S
Liczba izolatów Klebsiella
pneumoniae KPC(+)
7
Test fenotypowy KPC
Liczba izolatów Klebsiella
pneumoniae KPC(-)
13
Test fenotypowy KPC
Liczba izolatów Klebsiella
pneumoniae KPC(+)
fałszywie dodatnich
0
Potwierdzenie przez
KORDL
Liczba izolatów Klebsiella
pneumoniae KPC(-)
fałszywie ujemnych
0
Ocena wrażliwości na
karbapenemy
szczep I / szczep II
api 10S
Identyfikacja: Klebsiella pneumoniae
Test kombinowany z kwasem boronowym
szczep I KPC (+)
szczep II KPC (-)
Wnioski:
Otrzymane wyniki potwierdziły przydatność podłoża CHROMagar KPC firmy
GRASO w badaniu przesiewowym w celu wykrycia lub wykluczenia obecności
szczepów KPC. Zdecydowano o wdrożeniu procedury z zastosowaniem podłoża do
rutynowej diagnostyki.